1.試樣消煮。精密稱取混合均勻的牛奶樣品5.0 g(約25.0 mg氮,稱樣量不能太大,否則易起大量泡沫),精確至0.1 mg;小心放入消煮管,避免試樣附著在管壁;加入混合催化劑5.0 g,與試樣混合均勻;再加入12 mL和2~5 mL的雙氧水(牛奶脂肪含量高,在消煮前期極易起泡沫且泡沫不易消失,泡沫易粘附于管壁而影響結(jié)果的準(zhǔn)確性;加入雙氧水起消泡作用,且易使溶液澄清透明,可縮短消煮時(shí)間);420e加熱至液體呈透亮的藍(lán)綠色后,繼續(xù)加熱至少1 h;消煮好后關(guān)閉熱源讓其自然降溫。
2.蒸餾。向接受瓶?jī)?nèi)加入10 mL硼吸收液和3滴混合指示劑,使冷凝管末端浸入硼吸收液,蒸餾4 min;最后用蒸餾水沖洗凱氏定氮儀冷凝管末端,洗液并入蒸餾液。
3.滴定。蒸餾結(jié)束后蒸餾液立即用鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定,滴定至溶液由藍(lán)綠色變?yōu)榛壹t色,并同時(shí)做試劑空白對(duì)照。